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高壓均質(zhì)機(jī)破高效壁酵母菌提取核酸的實(shí)驗(yàn)操作案例

發(fā)布日期:2024-03-08 本文關(guān)鍵詞:高壓均質(zhì)機(jī)酵母菌破碎實(shí)驗(yàn),高壓均質(zhì)機(jī)細(xì)胞破碎實(shí)驗(yàn)

  實(shí)驗(yàn)背景

  

  酵母菌有多種類型,被廣泛應(yīng)用于食品、醫(yī)藥等領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)研究。酵母菌具有發(fā)酵生產(chǎn)成本低、生物合成能力高、安全無毒、繁殖能力強(qiáng)且易于培養(yǎng)等優(yōu)點(diǎn),使其成為重要的模式生物。在對酵母菌進(jìn)行各種研究的同時,其細(xì)胞的破碎率、破碎后蛋白質(zhì)和核酸的得率對后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究起到了十分重要的作用。

  

  實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簽橥瓿蓪湍妇鷺悠返木|(zhì)破碎,提取核酸,查看轉(zhuǎn)錄的目的基因,檢驗(yàn)轉(zhuǎn)錄是否成功。

  

  實(shí)驗(yàn)材料:酵母菌細(xì)胞懸液

  

  實(shí)驗(yàn)儀器

高壓均質(zhì)機(jī)

高壓均質(zhì)機(jī)JXNANO-15

  

  實(shí)驗(yàn)操作:

  

  1、使用2根膠管將冷水機(jī)的進(jìn)出水口和主機(jī)出料冷卻器連接。

  

  2、冷水機(jī)加水,打開冷水機(jī)進(jìn)行預(yù)冷。

  

  3、冷水機(jī)達(dá)到預(yù)設(shè)溫度后,確保壓力閥門處于松弛的狀態(tài)下,打開電源開關(guān)。

  

  4、進(jìn)料口處(料斗)先加入適量的水,排除管道內(nèi)的空氣。

  

  5、等待進(jìn)料杯水快完全進(jìn)入進(jìn)料口時,加入100ml的酵母菌,調(diào)節(jié)壓力1200bar~1600bar(120mpa~160mpa),進(jìn)行均質(zhì),重復(fù)三遍,得到均質(zhì)樣品。

  

  6、均質(zhì)后將樣品接入干凈的容器中。

  

  7、處理完樣品后,先卸壓,將泵體內(nèi)殘留液排盡。

  

  8、再加入清水,進(jìn)行清洗。


  實(shí)驗(yàn)效果:

圖片1.png

樣品均質(zhì)前后效果對比圖

  

  高壓均質(zhì)機(jī)對酵母菌樣品的破壁實(shí)驗(yàn)時間短、細(xì)胞破碎率高、核酸提取度高,對后續(xù)的實(shí)驗(yàn)研究很有幫助。高壓均質(zhì)機(jī)不僅對細(xì)胞破碎有良好的效果,對懸浮液(或乳化液)的均質(zhì)效果也非常理想;它可降低分散物尺度,使分散物分布更均勻,在生物技術(shù)和制藥領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用。

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